膜染色試薬 ブロッティング膜上のタンパク質を検出するCBB染色・脱色キットです。脱色後は抗体反応が可能で、トータルタンパク質によるノーマライズにも使用できます。

WSE-7160 EzStain AQua MEM

WSE-7160　EzStain AQua MEM （イージーステイン アクア MEM） 左から洗浄液 (500ｍL)、染色液 (500ｍL)、脱色液 (500ｍL)、完全脱色液 (500ｍL)
WSE-7160　EzStain AQua MEM （イージーステイン アクア MEM） 左から洗浄液 (500ｍL)、染色液 (500ｍL)、脱色液 (500ｍL)、完全脱色液 (500ｍL)
WSE-7160　EzStain AQua MEM （イージーステイン アクア MEM） 左から洗浄液 (500ｍL)、染色液 (500ｍL)、脱色液 (500ｍL)、完全脱色液 (500ｍL)

ブロットした膜上のタンパク質を検出する染脱色試薬キットです。CBB色素による鮮やかなブルーのバンドで感度よく検出します。検出後は、バンドの脱色をすることで、その後の抗体反応が可能です。酢酸を含んでいませんので酢酸臭もしません。
（MEM : membrane の略）

 

製品名 WSE-7160 EzStain AQua MEM
コード 2332375
価格 ¥25,800

動画で紹介

EzStainAQua MEMの使用方法

動画リンクはコチラ⇒

AQuaMEMサムネイル.png

目的・用途

ウエスタンブロッティング解析において、転写後の膜上のタンパク質を検出するための染脱色試薬キットです。抗体反応前に転写効率を確認するための染色を行います。染色した結果は、抗体反応後にターゲットタンパク質のノーマライズで使用できます。

製品概要

  • 膜上のタンパク質の検出が可能
  • 短時間で検出　染色1分、脱色5分程度
  • 鮮やかなブルーのバンド
  • 脱色後は抗原抗体反応可能
  • トータルタンパク質によるノーマライズに対応
  • ポンソーS より高感度
  • 酢酸臭なし

データ・資料

操作概要

1.転写後の膜上のトータルタンパク質の確認
 

操作概要_1.png

 ブロッティングが終わった膜をブロッティング装置から取り出します。
(1)前処理

操作概要_1_1.png

 「Wash」液をメタノールと1:1に混合して前処理溶液を調製し、トレイに入れます。ブロッティングが終わった膜を上記のトレイにいれ、振とうします。
(2)染色

操作概要_1_2.png

 「Wash」液を廃液し、「Stain」液をトレイに入れ、振とうします。
(3)脱色

操作概要_1_3.png

 「Stain」液を廃液し、「de-Stain」液をトレイに入れ、振とうします。
(4)検出

操作概要_1_4.png

 膜を、トレイから取り出します。バンドを目視し、転写結果を確認します。画像として保存する場合は、スキャナーまたは撮影装置を使用します。
2.抗体反応のためのタンパク質バンドの脱色
(1)前処理

操作概要_2_1.png

 「Wash」液をメタノールと1:1に混合して前処理溶液を調整し、トレイに入れます。染色し、転写結果を確認し終わった膜を上記のトレイにいれ、振とうします。
(2)完全脱色

操作概要_2_2.png

 「Wash」液を廃液し、「Bleach」液をトレイに入れ、振とうします。
(3)リンス

操作概要_2_3.png

 「Bleach」液を廃液し、純水でリンスします。
(4)抗体反応

操作概要_2_4.png

 ブロッキング操作から開始し、通常通り、抗体反応　～　検出を行います

 データ例

 

1.転写後の膜染色

転写後の膜を、1/2にカットし、一方は、従来の染色法(ポンソーS)で染色しました(A)。もう一方は、EzStainAQua MEMで染脱色しました(B)。
サンプルは、Hela細胞抽出液の3/4希釈系列を作製し、アプライしました。EzStainAQua MEMは、すべての濃度で検出できました。

(A)ポンソーS

20191128-_-S_medium.png

(B)EzStainAQua MEM

20191128-_AQuaMEM_medium.png

2.染色後の抗体反応

転写後の膜を、1/2にカットし、一方は、通常の操作で、抗体反応を行い、発光検出を行いました(A)。
もう一方は、EzStainAQua MEMで染脱色後に、同様に抗体反応をおこない、発光検出を行いました(B)。
どちらも同等の検出ができていることから、染色による抗体反応へ影響しないことが示されました。

(A)未染色

a_未染色.png

(B)染脱色

b_染脱色.png

3.トータルタンパク質によるノーマライズ

(A)EzStainAQua MEM

200519_83-1-0.25xAqua-dry_medium.png

(B)EzWestBlue W

2005221-83-1-_westBlue_dry_medium.png

 

 

Fig_large.png

　泳動後に転写した膜をEzStainAQua MEMで染色し、Printgraph Classicを用いて画像データを取得しました(A)。サンプルは、HepG2細胞抽出液の3/4希釈系列を作製し、アプライしました。取得した画像は、CS Analyzer 4を用いて、トータルタンパク質のシグナル値(輝度値)を算出しました。その後、Bleach液を用いてタンパク質バンドの脱色を行い、ターゲットタンパク質(GAPDH)の検出をEzWestBlue Wを用いて行い、CS Analyzer 4を用いて、シグナル値(輝度値)を算出しました(B)。それぞれ得られた輝度値の結果、およびトータルタンパク質でターゲットタンパク質をノーマライズした結果を右のグラフに示しました。トータルタンパク質(A)およびターゲットタンパク質(B)はどちらも濃度依存的に推移しています。また、トータルタンパク質によるノーマライズ値も、すべての希釈濃度においてほぼ同じ値を示しています。このように、EzStainAQua MEMおよびEzWestBlue Wを用いてトータルタンパク質によるノーマライズができることが確認されました。

ATTO タンパク質／核酸 染色液　セレクションガイド

       AE-1340 AE-1360 AE-1310 WSE-7160 WSE-7130 WSE-7135
EzStain AQua EzStain Silver EzStain Reverse EzStain AQua MEM EzFluoroStain DNA EzPreStain DNA&RNA
CBB.jpg Silver.jpg Reverse.jpg MEM.png FLS DNA.png PS DNA RNA.png
用途 タンパク質染色用 タンパク質/核酸（DNA/RNA) 染色用 タンパク質染色用 ブロッティング膜染色用 核酸（DNA）染色用
一本鎖は染色不可		 核酸（DNA/RNA）染色用
ゲル ポリアクリルアミドゲル アガロースゲル
ポリアクリルアミドゲル		 ポリアクリルアミドゲル - アガロースゲル
ポリアクリルアミドゲル		 アガロースゲル
ポリアクリルアミドゲル
検出　 発色（青色に染色）
明視野で撮影		 発色（茶褐色に染色）
明視野で撮影		 発色（バンド以外の部分が白濁）
明視野で黒いシートの上で撮影		 発色（青色に染色）
明視野で撮影		 蛍光
(Ex: 270/370/497 nm, Em: 522 nm)
UVまたはCyan励起
オレンジフィルター/YA-3		 蛍光
(Ex: 250/482 nm, Em: 509 nm)
UVまたはCyan励起
オレンジフィルター/YA-3
特長 Ready-to-use
高感度 CBB 染色 (10ng protein)
低バックグランド
 メタノール& 酢酸不含.
染色は30 分以内で完了
脱染色は水でOK		 Easy-to-use
高感度銀染色 (1ng protein, 10pg DNA)
グルタルアルデヒド不含
質量分析（MASS）適合
染色反応は最短55 分		 Easy-to-use
高感度ネガティブ染色 (2ng protein)
タンパク質の非染色検出法(バックグランドが白くなる)
ゲルからのタンパク質抽出適合
染色反応はわずか25分以内		 Easy to use
短時間検出（染色1分、脱色5分）
脱色後は抗原抗体反応可能
トータルタンパク質によるノーマライズに対応
ポンソーS より高感度		 Easy-to-use
低バックグラウンドで高感度検出
Blue/Cyan LED励起でUVより安全
EtBrより変異原性が低い（Ames）
脱色操作は不要
染色時間は最短10分		 Easy-to-use
1/2本鎖DNA、RNAの蛍光検出試薬
先染め可能（ゲル調整時に添加、泳動バッファーに添加）
後染め可能
容量

1 / 5 / 10  L
（3つのサイズあり）

① S-1：チオ硫酸ナトリウム
② S-2：硝酸銀
③ S-3：水酸化ナトリウム
④ S-4：チオ硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒド

各50mL

① R-1：ホウ酸、SDS
② R-2：硫酸亜鉛

各500 mL

① Wash 前処理液
② Stain 染色液
③ de-Stain 脱色液
④ Bleach 完全脱色液

各500 mL

 500μL（10,000×濃縮） 500μL（10,000×濃縮）
調製 不要 各試薬を蒸留水で100倍希釈 蒸留水50 mL に対し各溶液 10 mL混合 染色液以外はメタノールと等量混合
（メタノールは付属していません）		 TAE、TBEで10,000倍希釈 ゲル調整時に1/10000容量添加
TAE、TBEで10,000倍希釈
使用量 50ｍL/ミニゲル
ミニサイズゲルで20~25枚分		 ミニゲルで約50枚分 ミニゲルで約50枚分 ミニサイズゲルで20~25枚分 　- 　-
保存 室温　1年 冷蔵遮光　2年 室温遮光　2年 室温　1年 -20℃ 遮光　1年 -20℃ 遮光　1年

製品仕様

型式・名称 WSE-7160　EzStain AQua MEM（イージーステイン アクア MEM）
主成分 染色液：クマシーブリリアントブルー（CBB）色素
構成品形態 Wash 前処理液　　：500mL
Stain 染色液　   　：500mL
de-Stain 脱色液 　：500mL
Bleach 完全脱色液：500mL
使用前の調製 染色液を除きメタノールで１：１に混合
（メタノールは本製品に付属していません）
使用量 約0.2～0.3mL/cm2   
ミニサイズゲル（80x95mm）で20~25枚分
保存期間 室温　1年

 

サンプル提供

サンプル品のご依頼は下記ボタンのサンプル依頼フォームからどうぞ


blue_green.png

価格表

Prices are for domestic orders only.
製品コード 製品名 価格 数量
2332375 WSE-7160 EzStainAQua MEM 1セット 25,800円
Prices are for domestic orders only.

資料ダウンロード

各種資料をダウンロードいただけます。

カタログ

取扱説明書

WSE-7160 EzStain AQua MEM 取扱説明書（590.99 KB）

SDS

WSE-7160 EzStain AQua MEM SDS（414.74 KB）
WSC-2400 シーソーシェーカーatto¥155,000ゲルやブロッティング膜の染色・脱色・反応などでムラなく振とうするメトロノーム方式シェーカーですWSE-4115　パワードブロットAce¥168,000電源付きのセミドライブロッティング装置です。ミニスラブゲル1枚をブロッティングできます。WSE-4125　パワードブロット2M¥248,000電源付きのセミドライブロッティング装置です。ミニスラブゲル2枚まで同時にブロッティングできます。WSE-4025　ホライズブロット2M¥158,000セミドライブロッティング装置です。ミニスラブゲル2枚まで同時にブロッティングできます。WSE-4045　ホライズブロット4M¥198,000セミドライブロッティング装置です。ミニスラブゲル4枚まで同時にブロッティングできます。WSE-5400 プリントグラフClassic¥850,000～「WSE-5400 Printgraph Classic」はカラーCMOSカメラを搭載、高速起動～撮影～プリントのスタイルを持ちながら、画質にもこだわったゲル撮影装置です。WSE-5400用落射WhiteLEDプレートセット¥100,000WSE-5400 Printgraph Classic庫内に設置できる、染色・発色メンブレンや活性染色ゲル撮影用 落射白色LED光源です。